ניתוח PCR של תעתיקי slc12a7b/kcc4b בעורקים ובוורידים של סנפיר שלייר. פנוטיפים ארוכי סנפיר הנגרמים על ידי מוטציית מיסנס. ניסויים מחודשים עם פורל האגם באגם שלייר, בוואריה.
מדידת PCR של תמליל slc12a7b/kcc4b בעורקים וורידים של סנפיר schleier
שימוש בתגובת שרשרת הפולימראז להגברת ה–DNA ממדגם של חומר שמקורו באדם אינו הדרך המשעשעת ביותר לעשות עסקים. זה לא אומר ש–PCR הוא לא מאמץ משתלם בפני עצמו. מוצרי PCR שימושיים גם בניסויי מעבדה אחרים. חריג אחד בולט הוא הגנום האנושי. PCR הוא ברכה לקהילה הגנומית ומהווה ברכה לקהילה המדעית כולה. הקמת מעבדת PCR לדרך היא צעד חשוב במאבק על טיפולים מבוססי DNA בקהילה הרפואית. ככזה, תעשיית ה–PCR ראתה זרימה מתמדת של מצטרפים חדשים. נכון, מעבדות PCR צצות מימין ומשמאל. יותר ויותר, חוקרי ביוטכנולוגיה ורפואה משלבים את כישוריהם למען שיפור הקהילה הרחבה יותר. האם PCR ימשיך לפרוח בעתיד הוא תעלומה. אבל לעת עתה, מעבדת PCR היא מרכיב חיוני לתוכנית מוצלחת של טיפול רפואי ו–biobanking.
ניסויים מחודשים עם פורל האגם באגם שלייר, בוואריה
במהלך שנות ה-80, אוכלוסיית פורל האגם באגם שלייר, בוואריה, הייתה בירידה. האוכלוסייה נחשבה בעלת פוטנציאל להשפיע לרעה על פורל מקומי באגמים גדולים אחרים במערב ארצות הברית. נדרשה תוכנית ייעודית להפחתת גידול האוכלוסייה.
השלב הראשון בפיתוח תוכנית בקרה היה זיהוי מקור הבעיה. ההערכה היא שהבעיה היא זיהום המים. עומס הזיהום נקבע באמצעות ניתוח כימי של דגימות דגים. אפיתל הזימים הוא אינדיקטור רגיש לעומסי זיהום. יש לקחת בחשבון את דפוס ההפצה כאשר לוקחים דגימות דגים לניתוח כימי.
אמצעי בקרה ראשוני היה הפחתת זרחן בהזנה של פורל. זה הוביל לשיפור איכות המים בבריכות. כמו כן, נצפה כי הישרדות מוגברת של דגים הביאה לרבייה טבעית. בחמש השנים האחרונות, שיעורי הפציעות של מנורות ים ירדו לפחות מחמישה פצעים לכל 100 פורלים. זה הביא לירידה במספר הביצים המיוצרות מדי שנה.
בנוסף, הוגדל מספר הרשתות באגם כדי לצמצם את גידול האוכלוסייה. מאמץ זה התרחב בשנת 2015 וכלל כלי שיט נוספים וצוותים עם ניסיון דיג רב. רשתות הזימים היו מפוזרות על פני 60 מ' עומק.
מספר דגי האגמים שנתפסו במהלך סקרי התפוצה היה קבוע יחסית בין השנים 2010 ל-2017. בנוסף, ה–CPUE (צריכה–מוצרים–אנרגיה) של המלכוד היה גבוה מה–CPUe עבור כלל אוכלוסיית הטרולים באגם. זה מצביע על כך שגודלו של פורל האגם הצעיר קטן והגיוס חזק.
פנוטיפים ארוכי סנפיר הנגרמים על ידי מוטציית missense
באמצעות דג השלייר המהנדס גנטית כמערכת מודל, זיהינו ואפיינו מספר קבוצות גנים המעורבות בפנוטיפים ארוכי סנפיר. הקווים המוטנטים המתקבלים הם hemizigous עבור אחד או יותר מהגנים שהוזכרו לעיל, ומציגים מגוון תכונות.
בפרט, זיהינו שני גנים שנראים כמרכיבי מפתח בפנוטיפ בעל סנפיר ארוך. בדקנו מספר אללים עם אובדן תפקוד בדגי F0 הטרוזיגוטיים. מוטנטים אלה מראים מספר מאפיינים פנוטיפיים, החל ממבט בודד של עניין בזכרים ועד לשבט הטטרמורפי הזכר/נקבה הנדרש אצל הנקבות. כמו כן, נחשפה מוטציה חדשה של דג הזברה אשר עשויה להיות רלוונטית לאמור לעיל.
התגלית המרשימה ביותר היא שהאלל המוטנטי של schleier הנ"ל הוא מוטציה ישירה, אם כי קטנה מאוד, ב–Slc12a7a הנ"ל. זהו ממצא משמעותי, שכן גן זה הוא מרכיב קריטי ברשת מורכבת המתווכת חילופי K+-Cl– בין התאים בסנפיר, ורקמות אחרות. זה מתורגם לרשת בקנה מידה גדול של קינאזות פונקציונליות שתפקודן לא מובן. זיהינו גם מספר גנים אחרים המעורבים בקביעת התפקודים הנ"ל, ומידע זה יאפשר לנו להגדיר טוב יותר את הרשת הנ"ל. כעת התחלנו להשתמש במוטנטים אלה כמודלים למנגנונים הבסיסיים, אשר ככל הנראה יחשפו גנים רבים נוספים שיכולים לעזור להסביר את הפנוטיפים שהוזכרו לעיל.
טונוס כלי דם בסנפירי דג הזברה
אותות אנגיוגניים בדגי הזברה נשמרים עם אלו שבחולייתנים גבוהים יותר. התפתחות ECs מווסתת על ידי היררכיה של גנים להתמיינות תאים מזודרמליים. גורמים אנגיוגניים מתבטאים באבות עורקים וורידים כאחד. הם נמצאים גם במזודרם של הצלחת הצדדית. אבות מזודרמליים אלו מולידים תאי אנדותל כלי דם, המייצרים חומרים כלי דם ו–MCs כלי דם. אבי העורקים הוא שכבה צפופה של SMCs כלי דם.
המזודרם הלוחית הצידית מולידה גם נגזרות אחרות של MCs. MCs אלה נמצאים גם בכלי הדם הבוגרים. יש להם מאפיינים משותפים עם תאי שריר חלק של כלי דם (VSMs) בבעלי חוליות גבוהים יותר.
ישנם שני סוגים של מבשרי EC, המופיעים בו זמנית בגזע דג הזברה. הסוג הראשון, הנקרא ECs פרימיטיבי, מייצר ECs עורקי. הסוג השני, הנקרא ECs ורידי, מייצר כלי ורידים. שני מבשרי EC אלו יוצאים מניצן הזנב ומהגזע בו זמנית. הם מופרדים על ידי מנגנון דחיית תאים–תאים בתיווך EphrinB2/EphB4.
ה–MCs הוורידים בדג הזברה נגזרים גם ממזודרם לוחית רוחבית. עם זאת, יש מעט מידע על MCs ורידי בדג הזברה. מספר מחקרים בוצעו כדי לזהות MCs ורידי בדג הזברה. מחקרים אלה השתמשו בטכניקות שונות של מיקרוסקופיה.
תאי שריר חלק כלי דם הם אוכלוסייה הטרוגנית ביותר של תאים. הם מורכבים ממגוון רחב של פרופילי ביטוי גנים. הוכח שיש להם פונקציות שונות. הם יכולים למלא תפקיד מפתח בדלקת ובהומאוסטזיס של רקמות.
מסקנות
למרות היותו ארגז חול, דג השלייר חמק מאיתנו כבר די הרבה זמן. זה לא שאנחנו לא מעוניינים לתפוס טרמפ, אבל זה לא כל כך קל להגיד היי ולשמוע את השכנים באותו החדר. החברים החדשים שלנו היו אדיבים לחלוק איתנו כמה סיפורים. הם גם היו נדיבים מספיק כדי לספק הזדמנות לבחון את כוחנו. החלק הכי טוב בחוויה הזו היה להכיר אותם. לדוגמה, אחד החברים החדשים שלנו הצליח לספק כמה טיפים וטריקים שימושיים. היה תענוג להכיר אותם וללמוד עוד על התחביבים ותחומי העניין שלהם. אנו מצפים לחברות חדשה נהדרת בעתיד הקרוב.
